細胞運動和定位研究需要專門的細胞示蹤(細胞追蹤)熒光探針,首先必須要對活細胞無毒性,同時還要有多種熒光染料顏色可供選擇,以便匹配儀器的激光器和濾光片,并能與抗體或其他細胞分析探針共染。您可選擇用于短時程細胞追蹤或長時程細胞追蹤的被動擴散染料,或能追蹤5天甚至更久的熒光融合蛋白標記法。


短期細胞追蹤

  • 可快速加載標記(通常 15 分鐘至 1 小時)
  • 短期追蹤(一般 3-6 代)
  • 可適當耐光漂白/抗光淬滅
  • 熒光信號亮度適中
  • 信號分布于整個細胞

檢測細胞運動和定位的最簡單方法就是使用具有膜通透性的探針染料進入細胞并在加載后轉變為膜非通透性物質。理想的細胞追蹤染料需要可存留于分裂多代后的子細胞中,但不會通過接觸轉移到相鄰細胞中。

在工作濃度下保持穩定且無細胞毒性,可穩定存留在細胞中,且在生理 pH 條件下可發出明亮的熒光。

選擇短期細胞追蹤產品

BB-441924  細胞膜染色試劑 CM-Dil

BB-441945  細胞膜染色試劑 Deep Red Dye

BB-441961 細胞示蹤綠色熒光探針


長時程細胞追蹤

  • 細胞加載標記一般需要 1 小時
  • 可長時間追蹤(通常 可追蹤6-10 代)
  • 具有較強的耐光漂白/抗光淬滅特性
  • 熒光信號亮度高
  • 在整個細胞中呈點狀分布

細胞運動和定位的長時程追蹤需要示蹤熒光染料對光淬滅具有更強的抵抗性,并且能夠在細胞中存留更多代。

長時程追蹤需要更久的光穩定性,通常需要保留 6-10 代;染料標記加載時間在實驗方案中不是特別的重要。

利用熒光蛋白進行細胞追蹤/細胞示蹤

  • 熒光蛋白轉導實驗步驟簡單,直接加入即可
  • 放置過夜孵育
  • 可長時程追蹤細胞長達 2 周或超過 10 代
  • 可選擇紅色或綠色兩種熒光蛋白
  • 可與其他熒光染料或蛋白標記同時多色分析

瞬時轉導細胞可在細胞內的不同的特定位置表達熒光融合蛋白,在生長緩慢的細胞群中可表達至少 5 天或長達 2 周。標記后的細胞非常容易進行追蹤檢測,但并不是細胞群中的所有的細胞都能表達熒光蛋白。

采用熒光融合蛋白轉導法追蹤細胞可提供長時程追蹤,但由于并非所有細胞都能轉導,故可能不支持部分自動化檢測技術。